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세포도말·염색법
문제

체강액 세포도말 표본의 고정 단계에서 95% 에탄올을 즉시 사용하는 이유로 가장 적절한 것은?

체강액 세포도말 표본의 제작 과정:
• 신선한 체강액 검체 (흉수, 복수, 뇌척수액)
• 검체를 원심분리 (400~500 rpm, 5분)
• 침전물을 슬라이드에 도말
• 즉시 95% 에탄올로 고정
해설
체강액 세포도말 표본은 세포가 적고 섬세한 형태 특징이 중요하므로, 도말 후 즉시 95% 에탄올로 고정하여 세포가 건조되면서 발생하는 인공물(세포 수축, 핵의 농축)과 세포 용해를 방지해야 한다. 이는 세포형태의 보존과 진단 정확도를 높인다.
같은 주제 다음 문제자궁경부 액상세포진(liquid-based cytology) 검사에서 표본의 품질을 평가하기 위한 필수 요소로 가장 적절한 것은?

심화 해설

핵심 해설 이 문제는 체강액 세포도말 표본의 고정(Fixation) 단계에서 95% 에탄올(Ethanol)을 사용하는 근본적인 이유를 묻고 있어요. 체강액(흉수, 복수, 뇌척수액)은 세포 수가 적고 세포가 섬세하며, 검체 채취 후 시간이 지나면 세포가 자연 건조되면서 형태가 변형됩니다. 따라서 도말 후 즉시 95% 에탄올로 고정하는 것은 세포 건조로 인한 인공물(artifact) 형성과 세포 용해(lysis)를 방지하기 위함이 가장 핵심적인 목적입니다. 고정은 세포를 단단하게 만들어 형태를 보존하고, 이후 염색 과정에서도 안정적인 결과를 얻도록 도와줍니다. 1. 핵심 개념 분석 (Key Concept): 세포병리학(Cytopathology)에서 체강액 검체는 세포가 적고 형태학적 평가가 진단에 결정적입니다. 95% 에탄올습윤 고정(Wet Fixation) 방법으로, 알코올이 단백질을 침전시켜 세포 구조를 단단하게 만듭니다. 이 과정은 세포 내 수분을 빠르게 제거하여 자연 건조에 따른 수축, 핵 농축, 세포막 파괴 등의 인공물 생성을 막습니다. 2. 정답 근거 (Answer Rationale): 정답은 핵심! ③번입니다. 도말 후 공기 중에 방치하면 세포는 건조되며 모양이 왜곡되고 용해될 위험이 큽니다. 특히 체강액 검체는 세포가 적어 인공물이 생기면 진단이 불가능해질 수 있습니다. 따라서 즉시 95% 에탄올에 담가 고정하는 것이 표준작업지침서적 절차입니다. 3. 오답 분석 (Distractor Analysis): - ①번 원심분리로 손상된 세포 재생: 고정은 세포를 죽여 형태를 고정하는 것이지, 손상된 세포를 살리는 과정이 아닙니다. - ②번 핵산 보존을 위해 단백질 변성 최소화: 95% 에탄올은 오히려 단백질을 변성시켜(침전) 세포를 고정합니다. 핵산 보존은 포르말린 고정이나 특수 고정액의 목적입니다. - ④번 세포 내 효소 활성 유지: 고정의 목적은 효소를 불활성화하여 자가용해(autolysis)를 막고 형태를 보존하는 것입니다. 효소 활성을 유지하는 것은 반대입니다. - ⑤번 염색 시간 단축을 위한 세포막 투과성 증가: 에탄올 고정이 세포막 투과성을 다소 증가시키기는 하지만, 이는 부차적인 효과입니다. 혼동 주의! 체강액 세포도말에서 즉시 고정하는 주된 이유는 건조 방지입니다. 4. 연관 개념 정리 (Related Concepts): 고정액의 종류와 용도를 함께 알아두세요. 95% 에탄올은 세포학적 검사(자궁경부 세포검사 Pap smear, 체강액 세포검사)의 습윤 고정에 사용됩니다. 반면 포르말린(Formalin, 10% 중성 포르말린)은 조직병리학(Histopathology)에서 조직 절편 고정에 사용되며, 단백질 간 교차결합(cross-linking)을 유도합니다. 알코올 고정은 신속하지만 조직 투과성이 낮고, 포르말린은 느리지만 조직 전체를 고르게 고정합니다. 개념 정리: 체강액 세포도말 고정: 도말 직후 95% 에탄올에 즉시 침지 → 세포 건조 방지 → 형태 보존(핵, 세포질 세부 구조 유지) → 진단 정확도 향상. 건조 인공물: 세포 수축, 핵 농축, 세포 가장자리 찢김, 염색 불균일. 한눈에 비교!: 고정액 비교
고정액주 사용처고정 방식주요 목적
95% 에탄올세포학(세포도말, 체강액)단백질 침전(Precipitation)건조 방지, 형태 급속 보존
10% 중성 포르말린조직병리(조직 절편)단백질 교차결합(Cross-linking)조직 전체 균일 고정, 효소 불활성화
핵심 검사 포인트: 체강액 검체 도말 후 즉시 95% 에탄올에 고정하지 않으면 검체가 무용지물이 될 수 있습니다. 핵심! 검사실 SOP에는 '도말 즉시 95% 에탄올에 15~30분간 고정'이 명시되어 있습니다. 절대 공기 건조(air-dry)를 방치하지 마세요. 공기 건조된 검체는 세포 형태가 심하게 변형되어 판독이 불가능합니다. 국시 빈출 포인트: 체강액 세포도말 고정의 목적은 '건조 인공물 방지'가 가장 자주 출제됩니다. 다른 보기(효소 활성 유지, 핵산 보존 등)는 조직병리나 분자병리 고정의 목적으로 혼동하기 쉽습니다. 세포학과 조직병리의 고정 목적 차이를 반드시 구분하세요. 기출 변형 주의!: '체강액 세포도말 검체를 24시간 실온에 방치한 후 고정했을 때 예상되는 문제점은?'이라는 식으로 응용 출제 가능. 건조 인공물, 세포 용해, 세균 오염 증가 등이 정답이 될 수 있습니다.

임상 시나리오

검사실 실무 가이드 검사실 시나리오 (Laboratory Scenario): 종합병원 진단검사의학과 병리검사실에서 흉막삼출액(pleural effusion) 검체를 받았습니다. 검체는 채취 후 30분 이내에 도착했고, 검체 용기에는 항응고제(헤파린 등)가 들어있지 않습니다. 임상병리사는 검체를 원심분리(400~500 rpm, 5분)하여 침전물을 슬라이드에 도말했습니다. 핵심! 도말 직후, 슬라이드를 공기 중에 잠시라도 방치하지 않고 즉시 95% 에탄올 용기에 담가 고정해야 합니다. 검사 수행 및 결과 보고 전략 (Testing & Reporting): 1. 검체 접수 및 전처리: 체강액 검체 접수 시 응고 여부를 확인합니다. 응고된 검체는 세포가 덩어리져 세포도말이 어려우므로 재채취를 요청해야 합니다. 2. 원심분리: 400~500 rpm으로 5분간 저속 원심분리하여 세포 침전물을 얻습니다. 고속 원심분리 시 세포가 파손될 수 있습니다. 3. 도말 및 즉시 고정: 침전물을 슬라이드에 얇고 고르게 펴 바른 후, 5초 이내에 95% 에탄올 용기에 슬라이드를 완전히 잠기도록 넣습니다. 고정 시간은 최소 15분 이상 유지합니다. 4. 염색: 고정 후 파파니콜로염색(Papanicolaou stain) 또는 메이-그뤼발트-김자염색(MGG stain)을 시행합니다. 5. 결과 보고: 세포병리의사(병리과 전문의)가 판독 후 결과를 보고합니다. 임상병리사는 검체 전처리 및 염색 품질을 보장하는 역할을 합니다. 검체 안전 및 주의사항 (Precautions): - 체강액은 감염성 검체(결핵, 악성 종양 세포 등)일 수 있으므로 생물안전 2등급(Biosafety Level 2, BSL-2) 시설에서 취급해야 합니다. - 95% 에탄올은 인화성 물질이므로 화기 근처에서 사용 금지, 환기가 잘 되는 곳에서 작업합니다. - 고정 시간이 지나치게 길어지면 세포가 과도하게 단단해져 염색이 잘 안 될 수 있습니다. - 검체 채취 후 1시간 이내에 처리하지 못하면 세포가 자가용해되므로 검체 보관 상태(냉장 보관, 4℃)를 확인하고, 가능한 빨리 처리합니다. 선배 임상병리사의 한마디 "체강액 검체는 '세포가 적고 섬세하다'는 특징 때문에 검사 전 단계가 정말 중요해요. 도말 후 공기 중에 10초만 방치해도 세포가 건조되면서 인공물이 생기고, 그 검체는 진단 가치를 잃을 수 있어요. 항상 슬라이드를 에탄올 용기 옆에 두고, 도말하는 즉시 집어넣는 습관을 들이세요. 국시에서도 이 개념은 빠지지 않고 나오니 꼭 기억해 두세요!"
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