part6. 진단세포학
(1) 세포진 도말법과 액상세포검사
① 세포 블록(Cell block)
- 세포들의 군집 구조가 유지되어 세포의 기원·분화 인지가 쉬움
- 파라핀 블록 보관으로 재염색·특수염색 추적검사 가능
② 액상세포검사법(Liquid-based cytology)
- 세포 검체를 보존액에 분산시켜 단층(monolayer)으로 도말하는 방법
- 보존액 성분으로 점액 용해, 적혈구 용혈, 염증세포 제거됨(세포성분에는 영향 없음)
- 깨끗한 배경으로 이상세포 출현빈도 증가, 위양성·위음성 감소
📌 실전 체크 포인트!
액상세포검사법 장점: 단층 도말, 깨끗한 배경, 위양성·위음성 감소
대표 방법: ThinPrep 액상세포검사법
(2) 고정법
① 종류
| 고정법 |
방법·용도 |
| 습윤고정법(wet fixation) |
도말 즉시 95% 에탄올에 고정, 가장 일반적, 건조되지 않도록 주의 |
| 건조고정법(dry fixation) |
도말 즉시 신속 건조(가열·드라이어), 메탄올 고정액, 김자 염색에 이용 |
| 분사고정법(spray fixation) |
원거리 운반 시 사용, 아이소프로필알코올+폴리에틸렌글리콜, 20 ㎝ 높이에서 1~2초 분사, 1회 분사로 충분 |
② 건조산물(dry artifact)
- 습윤고정 시 건조되면 핵이 심하게 팽창·염색 불량이 일어남
- 세포진단을 어렵게 하는 요소이므로 반드시 피해야 함
③ 분사 고정 후 처리
- 염색 전 건조된 고정제 제거: 신선한 95% 에탄올에 5분씩 두 번 처리
📌 실전 체크 포인트!
습윤고정: 95% 에탄올, 건조 금지 / 건조고정: 메탄올, 김자 염색용
분사고정액: 아이소프로필알코올-폴리에틸렌글리콜
(1) 파파니콜라우 염색(Pap stain)
① 목적과 특징
- 세포진단에 사용하는 일반염색으로 핵 및 세포질의 성숙도·분화도 감별에 이용
- 장점: 핵 염색질이 잘 염색되어 미세구조 명확, 세포질 투명도 높고 다염색성
- 단점: 시약이 pH에 민감하여 변성된 세포의 염색성이 불량
② 염색 순서
- 95% 에탄올 습윤고정 → 함수(90%→70%→60%→수세) → 해리스 헤마톡실린 핵염색 → 산알코올 탈색 → 청색화 → 불완전 탈수(70%→80%→95%, 무수알코올 제외) → OG 세포질 염색 → 95% 에탄올 수세 → EA 세포질 염색 → 완전 탈수 → 크실렌 투명 → 봉입
📌 실전 체크 포인트!
파파니콜라우 고정: 95% 에탄올 습윤고정
불완전 탈수: OG·EA 용액이 95% 에탄올에 희석되어 있어 무수알코올까지 탈수하지 않음
(1) 자궁경부 세포
① 정상 세포 구성
- 자궁경부는 편평상피와 원주상피의 이행대(squamocolumnar junction)가 중요
- 편평상피세포: 표층(superficial)·중간층(intermediate)·방기저층(parabasal)·기저층(basal) 4개 층으로 구성
- 원주상피세포: 점액 분비성 원주세포
② 감염성 변화
- 트리코모나스: 핵 주위 창백 구역(halo)
- 헤르페스: 다핵 거대세포, 젖빛유리(ground-glass) 핵
- 칸디다: 균사와 분아포자
- 클라미디아: 세포질 내 공포
📌 실전 체크 포인트!
편평상피 4층(성숙 순서): 기저층 → 방기저층 → 중간층 → 표층
위축성(폐경기) 세포진단: 방기저층세포 우세 → 표층세포 감소
(2) 세포 이상과 진단 보고
① 베데스다 시스템(Bethesda system)
- 정상 범주: 음성(NILM, Negative for Intraepithelial Lesion or Malignancy)
- 상피세포 이상: ASC-US, ASC-H, LSIL, HSIL, 편평상피세포암
- 선세포 이상: 비정형선세포(AGC), 선암
📌 실전 체크 포인트!
LSIL(저등급 편평상피내병변): HPV 감염·경도 이형성 / HSIL(고등급): 중증~상피내암
베데스다 보고는 검체 적합성 + 일반 분류 + 서술 진단 형식으로 구성