臨床情境與檢驗原理
在肺結核與非結核分枝桿菌(NTM)的鑑別診斷中,痰塗片耐酸菌染色鏡檢(AFB smear)與核酸增幅檢驗(PCR)扮演了互補的角色。AFB 染色鏡檢是基於分枝桿菌細胞壁富含脂質(mycolic acid)的特性,能抵抗酸性酒精的脫色,因此在顯微鏡下呈現紅色桿菌。然而,這項檢查無法區分結核分枝桿菌(MTB)與非結核分枝桿菌(NTM),因為兩者皆為耐酸菌。相對地,臨床上常規使用的結核分枝桿菌核酸增幅檢驗(MTB-PCR)則是針對結核分枝桿菌複合群(MTBC)特有的基因片段(如 IS6110 插入序列)進行專一性偵測,因此具有高度的物種特異性。
選項解析與正確組合
根據上述檢驗原理,痰液中若存在「非結核分枝桿菌」(NTM),其檢驗結果組合會呈現 AFB 陽性但 MTB-PCR 陰性的情形。這是因為 NTM 在顯微鏡下同樣會被染成耐酸菌,但因其基因序列與結核分枝桿菌不同,故無法被專一性的結核菌 PCR 試劑檢測出來。此鑑別診斷上的困境,正是臨床上需要仰賴後續培養或分子生物學方法(如 multiplex PCR)來區分 NTM 與 MTB 的原因,相關研究也指出在初始 AFB 陽性患者中,建立預測模型來區分兩者是重要的臨床課題
[1]。相對地,若 AFB 與 PCR 皆為陽性,則高度指向結核分枝桿菌感染;若兩者皆為陰性,則可能無分枝桿菌感染或菌量過低;若 AFB 陰性但 PCR 陽性,則可能為結核分枝桿菌感染但菌量稀少,或檢體中含有抑制物影響染色判讀。
臨床實務與診斷思維
在臺灣的臨床實務中,當收到痰液檢體時,通常會同時開立 AFB 染色與 MTB-PCR 檢驗。若出現 AFB 陽性但 MTB-PCR 陰性的結果,實驗室通常會發出「AFB 陽性,MTB-PCR 陰性,疑為非結核分枝桿菌(NTM)」的初步報告,並將檢體接種於固態或液態培養基,待生長後再以分子方法或免疫色譜法(如 MPT64 抗原檢測)進行菌種鑑定
[3]。近年來,多重聚合酶鏈反應(multiplex PCR)技術的發展,已能在呼吸道檢體中直接同步偵測結核分枝桿菌與特定致病性較高的 NTM 菌種(如鳥型分枝桿菌複合群 MAC、膿瘍分枝桿菌複合群 MABSC),大幅縮短了鑑別診斷的時間
[4]。在巴拿馬等偏遠地區的研究也顯示,直接從痰塗片萃取 DNA 進行分子鑑定,能有效發現被低估的 NTM 肺部感染問題
[2]。因此,正確解讀 AFB 與 PCR 的組合結果,是啟動後續適當抗微生物治療與感染管制措施的關鍵第一步。
參考文獻(論文來源)
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Evaluation of clinical usefulness of a commercial multiplex PCR for diagnosing mycobacterial infections: a multicenter study.研究論文此多中心研究驗證商用多重PCR能快速區分結核菌與非結核分枝桿菌,可改善臨床診斷與治療決策。Cano-Fernandez M, Barrado L, Bermudez-Marvalc H, Cabrera-Pineda M, Diaz-De-La-Torre I, Domingo D, Hernandez S, Garcia-Martinez J, Lopez-Roa P, Loras-Gallego C, Muñoz-Egea M-C, Ruiz-Serrano M-J, Simon M, Tato M, Toro C, Valverde-Canovas JF, Viñuela-Gonzalez L, Esteban J, Salar-Vidal L. (2026) · DOI: 10.1128/spectrum.00175-26