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특수 염색
문제

다음 중 항산균(acid-fast bacilli)을 검출하는 데 사용되는 특수 염색법은?

해설
지일-닐센(Ziehl-Neelsen) 염색은 항산균(Mycobacterium 속 등)을 검출하는 대표적인 특수 염색으로, 항산균은 카르볼푸크신에 의해 붉은색으로 염색되고 산·알코올 탈색에 저항한다. 그로코트 메테나민 실버는 진균, 와르틴-스타리는 스피로헤타, 브라운-홉스는 세균(그람 양성·음성) 검출에 사용된다.
같은 주제 다음 문제수단 블랙 B(Sudan Black B) 염색에 대한 설명으로 옳은 것은?

심화 해설

핵심 해설 핵심 개념 분석 (Key Concept)
이 문제는 다양한 특수 염색법(Special Stain)의 용도와 원리를 정확히 구분할 수 있는지를 묻고 있어요. 특히 항산균(Acid-Fast Bacilli, AFB)을 검출하는 염색법이 무엇인지 아는 것이 핵심입니다. 항산균은 세포벽에 마이콜산(Mycolic Acid)이라는 긴 사슬 지방산 성분이 풍부하여 일반적인 그람염색(Gram Stain)으로는 잘 염색되지 않으며, 산과 알코올에 강한 내성을 보입니다. 따라서 이를 특이적으로 염색하기 위해 강력한 염색액과 가열 또는 장시간 반응이 필요합니다. 정답 근거 (Answer Rationale)
핵심! ⑤번 지일-닐센 염색(Ziehl-Neelsen Stain, ZN stain)이 정답입니다. 이 염색법은 항산균을 검출하는 가장 대표적이고 표준적인 방법입니다. 원리는 가열(또는 냉염색법의 경우 계면활성제 사용)하여 카볼푸크신(Carbol fuchsin)이 세포벽의 왁스층을 통과하게 한 후, 3% 염산-알코올(acid-alcohol)로 탈색합니다. 항산균은 탈색되지 않고 붉은색을 유지하며(항산성 양성), 대조염색인 메틸렌블루(Methylene blue)에 의해 배경 세포와 다른 세균은 파란색으로 염색됩니다. 오답 분석 (Distractor Analysis)
혼동 주의! ①번 와르틴-스타리 염색(Warthin-Starry Stain)혼동 주의! 스피로헤타(Spirochetes)균(예: 매독균 Treponema pallidum)을 검출하는 은염침법(silver impregnation)입니다. 항산균 염색과는 원리가 완전히 달라요.
②번 그로코트 메테나민 실버 염색(Grocott-Gomori methenamine silver stain, GMS)은 진균(Fungi)의 세포벽에 있는 다당류를 검출하는 데 사용됩니다. 폐포자충(Pneumocystis jirovecii)이나 아스페르길루스(Aspergillus) 등 진균 검출이 목적입니다.
③번 브라운-홉스 염색(Brown-Hopps Stain)혼동 주의! 변형된 그람염색법의 일종으로, 조직 절편 내에서 그람양성균(Gram-positive)과 그람음성균(Gram-negative)을 구분하여 염색하는 데 사용됩니다. 항산균 검출용이 아닙니다.
④번 디프-퀵 염색(Diff-Quik Stain)은 로마노프스키 염색(Romanowsky stain) 계열의 신속 염색법으로, 말초혈액도말(Peripheral Blood Smear)이나 골수흡인(Bone Marrow Aspirate) 표본에서 세포질과 핵의 형태를 관찰하는 데 주로 사용됩니다. 연관 개념 정리 (Related Concepts)
항산균 검출을 위한 다른 방법으로는 케이니언 염색(Kinyoun Stain)이 있습니다. 지일-닐센 염색과 원리는 같지만, 가열 과정 없이 높은 농도의 염색액과 계면활성제를 사용하는 냉염색법(Cold stain)입니다. 또한 최근에는 형광염색법인 아우라민-로다민 염색(Auramine-Rhodamine Stain)이 민감도가 높아 널리 사용됩니다. 임상검사실에서는 배양 전 선별검사로 형광염색법을, 확진 또는 형태 확인을 위해 지일-닐센 염색을 병행하기도 합니다. 개념 정리
특수 염색법주요 검출 대상
지일-닐센 염색(ZN)항산균 (Mycobacterium tuberculosis 등)
그로코트 메테나민 실버(GMS)진균 (Fungi)
와르틴-스타리스피로헤타 (Spirochetes)
브라운-홉스조직 내 그람양성균/그람음성균
디프-퀵혈액/골수 세포 형태 (로마노프스키 염색 계열)

한눈에 비교! 항산균 염색법 비교: - 지일-닐센(ZN): 열을 가하는 가열법 (Heat fixation) -> 항산균: 붉은색, 배경: 파란색 - 케이니언(Kinyoun): 가열 없이 고농도 염색액 사용 (Cold stain) -> 염색 결과는 동일 - 아우라민-로다민(Auramine-Rhodamine): 형광염색법 -> 항산균: 노란색 형광, 배경: 어둡게 보임 (민감도 높음) 암기 팁 지일-닐센(ZN)은 "지글지글 끓여서(Z는 뜨거운 느낌) 항산균을 잡는다"고 외워보세요. 가열 과정이 필요하다는 점을 강조해서 기억하는 겁니다. 반면 케이니언(K)은 "Cool하게(가열 없이) 하지만 강하게(고농도) 염색한다"로 외우면 두 방법의 차이가 더 선명해져요. 국시 빈출 포인트 임상병리사 국가고시에서 특수 염색법 문제는 '검출 대상'과 '염색 결과(색깔)'를 연결지어 출제되는 경우가 매우 많습니다. 특히 지일-닐센 염색이 항산균 검출용이라는 것은 기본 중의 기본이며, 오답 보기로 자주 나오는 GMS(진균)나 와르틴-스타리(스피로헤타)와의 혼동을 조심하세요. 기출 변형 주의! 단순히 "어떤 염색법인가?"에서 나아가, "객담 검체에서 항산균 도말검사 결과를 현미경으로 판독하시오"와 같은 형태로 출제될 수 있습니다. 예를 들어, ZN 염색 후 적색 막대균(Red bacilli)이 관찰되면 항산균 양성(AFB positive)으로 판독하며, 그 수에 따라 1+ ~ 4+ 또는 음성으로 보고하는 기준(예: 300시야에서 1-2개일 경우 "희소" 또는 "1+" 등)까지 알아두는 것이 좋습니다.

임상 시나리오

검사실 실무 가이드 검사실 시나리오 (Laboratory Scenario)
호흡기내과 병동에서 기침과 객담, 발열이 지속되는 45세 남성 환자의 객담 검체(Sputum specimen)가 진단검사의학과 미생물 검사실로 도착했습니다. 결핵(Mycobacterium tuberculosis)이 의심되는 환자입니다. 임상병리사는 이 검체로 어떤 검사를 우선 시행해야 할까요? 검사 수행 및 결과 보고 전략 (Testing & Reporting)
1. 검체 접수 및 전처리 (Pre-analytical Check): 객담 검체의 질을 먼저 평가합니다. 타액이 아닌 기도 점막하 분비물인지 확인하고, 농도와 색깔을 관찰합니다. 검체가 적절하면 N-아세틸-L-시스테인(NALC)-NaOH 방법으로 농축 및 오염균 제거 과정을 거칩니다.
2. 염색 및 현미경 검사: 농축된 검체를 슬라이드에 도말하고 지일-닐센 염색(ZN stain)을 시행합니다. 또는 민감도가 높은 아우라민-로다민 형광염색으로 먼저 선별검사를 할 수도 있습니다.
3. 결과 판독 및 보고: 현미경 100배(유침) 시야에서 적색의 항산균이 관찰되면 항산균 양성(AFB positive)으로 보고합니다. 관찰된 균수에 따라 판독 기준을 적용합니다 (예: 300시야에서 1-2개: 1+, 1-9개/100시야: 2+, 1-9개/10시야: 3+, 10개 이상/시야: 4+). 핵심! 양성 결과는 즉시 감염내과 의사에게 위험치 보고(Critical Value Report)를 해야 합니다.
4. 추가 검사: 도말 양성일 경우 반드시 배양 검사(Culture) 및 항결핵제 감수성검사(Antimicrobial Susceptibility Test, AST)를 진행하여 확진하고, 약제 내성 여부를 확인해야 합니다. 결핵균은 배양에 4~6주가 소요되므로 신속한 치료 결정을 위해 핵산증폭검사(Nucleic Acid Amplification Test, NAAT)인 Xpert MTB/RIF 검사가 병행되기도 합니다. 검사실 표준작업절차 - 항산균 도말검사 SOP: 검체 전처리 -> 도말 -> 고정 -> ZN 염색(가열 5분, 탈색 2분, 대조염색 1분) -> 건조 -> 현미경 검경 -> 결과 판독 및 기록 -> 정도관리(QC) 슬라이드와 비교 확인 - 핵심! 매 검사 시 양성 정도관리 물질(Positive Control)음성 정도관리 물질(Negative Control)을 함께 염색하여 염색 과정이 적절하게 이루어졌는지 반드시 확인해야 합니다. 선배 임상병리사의 한마디 "결핵 진단의 첫 단추는 항산균 도말검사예요! 이 검사가 양성이라면 환자는 격리(isolation)가 필요하고, 치료도 즉시 시작해야 합니다. 임상병리사가 신속하고 정확하게 도말 결과를 내는 것이 환자의 전염성 평가와 치료 방향에 큰 영향을 미쳐요. 검체 전처리부터 염색 과정 하나하나가 정말 중요하니, SOP를 철저히 지키는 습관을 길러두세요!"
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