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임상병리학
문제

사진의 조직표본에서 핵은 청자색, 세포질과 콜라겐은 분홍색으로 관찰된다. 적용된 염색법은? 출처: Mikael Häggström , M.D. Author info - Reusing images - Conflicts of interest: None Mikael Häggström , M.D. Consent note : Consent from the patient or patient's relatives is regarded as redundant, because of absence of identifiable features ( List of HIPAA identifiers ) in the media and case information ( See also HIPAA case reports guidance )., CC0 via Wikimedia Commons

일반·특수 염색법 · Histology of thalamic neuron.
해설
Hematoxylin은 핵을 청자색으로, eosin은 세포질과 세포외 단백질을 분홍색으로 염색한다.
같은 주제 다음 문제국제 10-20 전극 배치법에서 전극 Cz의 위치로 옳은 것은?

심화 해설

H&E 염색의 원리

H&E 염색(hematoxylin & eosin)은 조직병리의 기본 염색으로, 성질이 반대인 두 색소를 이어서 쓴다.

헤마톡실린은 매염제와 결합해 양전하를 띠는 염기성 색소다. 그래서 음전하를 띤 핵산(DNA·RNA)에 결합해 핵과 리보솜이 풍부한 세포질을 청자색으로 물들인다. 이렇게 헤마톡실린에 잘 물드는 성질을 호염기성(basophilic)이라 한다.

에오신은 음전하를 띤 산성 색소로, 양전하를 띤 단백질에 결합해 세포질·콜라겐·근섬유·적혈구를 분홍색으로 물들인다. 이 성질이 호산성(eosinophilic)이다.

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염색 과정과 흔한 실패

순서는 탈파라핀 → 함수 → 헤마톡실린 염색 → 분별(differentiation) → 청화(blueing) → 에오신 염색 → 탈수 → 투명화 → 봉입이다.

분별은 산성 알코올로 과잉 염색을 씻어내 핵의 크로마틴 구조가 드러나게 하는 단계이고, 청화는 알칼리성 용액에서 헤마톡실린을 안정적인 청색으로 바꾸는 단계다. 두 단계가 어긋나면 핵이 뭉개지거나 갈색조로 남는다.

핵이 흐릿하면 염색 시간 부족이나 과도한 분별을, 전체적으로 지나치게 붉으면 에오신 과염색이나 분별 부족을 먼저 의심한다. 시약의 pH와 사용 횟수, 탈파라핀 불량도 흔한 원인이다.

임상 시나리오

H&E 염색 품질 관리색이 이상하면 순서를 거슬러 올라간다

핵이 흐리고 크로마틴 구조가 안 보이면 헤마톡실린 염색 시간 부족이나 과도한 분별을 먼저 점검한다. 분별액의 산 농도와 담그는 시간이 핵심 변수다.

핵이 청색이 아니라 갈적색으로 남으면 청화 단계가 불충분한 것이다. 알칼리성 용액의 pH와 수세 상태를 확인한다.

표본 전체가 지나치게 붉으면 에오신 과염색 또는 분별 부족을, 얼룩덜룩하면 탈파라핀 불량을 의심한다. 시약 교체 주기와 사용 횟수를 함께 기록해 두면 원인 추적이 빨라진다.

주의

매 염색 배치에 알려진 정상 조직을 대조 슬라이드로 함께 돌리면, 표본 문제와 시약 문제를 즉시 구분할 수 있다.

핵심 개념

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