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유전자 재조합 기술

아래 실험 결과를 바탕으로 한 해석으로 옳은 것은?

연구자가 목적 유전자(2.0 kb)를 EcoRI 단일 절단 벡터(5.0 kb)에 삽입하여 형질전환 대장균 콜로니를 얻었다. 재조합 여부를 확인하기 위해 각 콜로니에서 플라스미드를 추출한 후 EcoRI로 절단하여 전기영동하였다.

콜로니 A: 5.0 kb 단일 밴드
콜로니 B: 5.0 kb + 2.0 kb 두 밴드
콜로니 C: 5.0 kb + 4.0 kb 두 밴드
콜로니 D: 7.0 kb 단일 밴드
해설
EcoRI 단일 부위를 가진 5.0 kb 벡터에 2.0 kb 삽입 단편을 연결할 때, 벡터 자가 결찰이 일어나면 EcoRI 절단 시 5.0 kb 선형 단일 밴드가 나온다(콜로니 A). 삽입 단편이 단일 삽입되면 총 7.0 kb 플라스미드가 형성되고, EcoRI 절단 시 5.0 kb + 2.0 kb 두 밴드가 나와야 하는데, 콜로니 D의 7.0 kb 단일 밴드는 EcoRI 절단 후 선형화된 것으로 이 역시 목적 유전자 단일 삽입 재조합체이다. EcoRI 부위가 삽입 단편 내부에 없다면 절단 시 두 밴드가 아닌 단일 선형 밴드가 나온다. 콜로니 B(5.0+2.0 kb)는 삽입 단편 내부에 EcoRI 부위가 하나 더 있어 세 조각으로 잘린 것이 아니라, 삽입 단편 자체가 EcoRI 부위를 내부에 가져 5.0+2.0 kb로 나뉜 경우이다. 콜로니 C(5.0+4.0 kb)는 4.0 kb 삽입 단편이 들어간 재조합체이다. 선택지 1은 콜로니 B에 대한 설명이 틀렸고(방향성은 단일 EcoRI 절단으로 구분 불가), 선택지 5는 콜로니 D 해석이 틀렸다(2개 삽입 시 9.0 kb 플라스미드 형성, EcoRI 절단 시 5.0+2.0+2.0 kb 세 밴드 예상).
같은 주제 다음 문제제한효소를 이용하여 외래 유전자를 벡터에 삽입할 때, 외래 DNA와 벡터 모두를 동일한 제한효소로 절단하면 점착성 말단이 형성된다. 그런데 실험자가 외래 DNA와…이 문제가 수록된 문제집[2027 국시대비] 실전 문제로 끝내는 분자생물학 문제은행12,900원
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