외워야 할 것 1. 배지와 염색법 | 마이메르시 MyMerci
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외워야 할 것 1. 배지와 염색법

외워야 할 것 1. 배지와 염색법

배지는 이름만 외우면 헷갈립니다. 어떤 성분이 무엇을 막고, 어떤 균이 어떤 색으로 바뀌는지를 한 쌍으로 묶어 외웁니다.

1.배지: 이름 - 분류 - 쓰임

배지는 영양 배지, 선택 배지, 감별 배지, 증균 배지로 나뉩니다. 선택 배지는 억제 물질로 원하지 않는 균을 막고, 감별 배지는 발효나 용혈 같은 반응을 색으로 보여 줍니다. 실제 시험에서는 한 배지가 선택과 감별을 함께 하는 경우가 많습니다.

(1) 일반 세균 분리용

배지분류핵심 쓰임
혈액한천(Blood agar)영양 + 감별대부분의 세균을 키우며 α·β·γ 용혈을 관찰합니다.
초콜릿 한천(Chocolate agar)영양(풍부)가열로 적혈구를 터뜨려 X·V 인자를 내놓기 때문에 Haemophilus와 Neisseria가 자랍니다.
맥콘키 한천(MacConkey agar)선택 + 감별담즙염과 crystal violet이 그람양성균을 막고, lactose를 발효하는 균은 분홍색 집락을 만듭니다.
EMB 한천(Eosin methylene blue)선택 + 감별그람음성막대균을 고르고, 대장균은 금속 광택이 나는 녹색 집락을 만듭니다.
만니톨 염 한천(Mannitol salt agar)선택 + 감별7.5% NaCl이 대부분의 균을 막고, 황색포도알균은 mannitol을 발효해 배지가 노랗게 변합니다.
CNA 한천(Colistin-nalidixic acid)선택colistin과 nalidixic acid가 그람음성균을 막아 그람양성구균을 고릅니다.
Mueller-Hinton 한천검사용디스크 확산법 항균제 감수성 검사의 표준 배지입니다.

(2) 장내 병원균과 특수 균

배지분류핵심 쓰임
SS 한천 · XLD 한천 · Hektoen 한천선택 + 감별Salmonella와 Shigella를 고릅니다. H2S를 만드는 Salmonella는 중심이 검게 보입니다.
TCBS 한천선택 + 감별Vibrio를 고릅니다. sucrose를 발효하는 V. cholerae는 황색, V. parahaemolyticus는 청록색 집락입니다.
CIN 한천선택Yersinia enterocolitica를 고릅니다.
Campy-BAP 등 Campylobacter 배지선택항균제를 넣어 Campylobacter를 고르고, 42℃ 미호기 조건에서 배양합니다.
Thayer-Martin 한천선택(초콜릿 기반)vancomycin, colistin, nystatin(VCN)으로 잡균을 막아 Neisseria gonorrhoeae를 고릅니다.
BCYE 한천영양 + 선택L-cysteine과 철이 있어야 자라는 Legionella용입니다.
Regan-Lowe 한천 · Bordet-Gengou 한천선택백일해균(Bordetella pertussis)용입니다.
담즙 에스쿨린 한천(Bile esculin)선택 + 감별담즙에서 자라며 esculin을 가수분해해 검게 변하면 장알균과 D군 연쇄알균입니다.
Löwenstein-Jensen 배지선택(달걀 기반)malachite green이 잡균을 막아 결핵균을 키웁니다. 집락이 나오기까지 수 주가 걸립니다.
Sabouraud dextrose 한천선택(진균용)낮은 pH(약 5.6)와 포도당으로 진균을 키웁니다.
Cornmeal-Tween 80 한천감별Candida의 후막포자와 가성균사 형성을 확인합니다.

📌 배지에서 자주 묻는 쌍

대장균은 맥콘키에서 분홍색, EMB에서 금속 광택입니다. 황색포도알균은 만니톨 염 한천에서 노랗게 변합니다. 임균은 Thayer-Martin, 레지오넬라는 BCYE, 결핵균은 Löwenstein-Jensen이 짝입니다.

2.염색법: 이름 - 대상 - 결과 색

염색법은 어떤 구조가 무엇과 결합해 어떤 색이 나오는지로 외웁니다. 결과 색은 염색 순서를 따라가면 헷갈리지 않습니다.

(1) 세균과 진균

염색법대상결과
그람 염색세균 전반crystal violet, iodine, 탈색(alcohol 또는 acetone), safranin 순서입니다. 그람양성균은 보라색, 그람음성균은 분홍색(적색)입니다.
Ziehl-Neelsen 염색항산균(결핵균 등)가열한 carbol fuchsin으로 염색하고 산-알코올로 탈색합니다. 항산균은 적색, 배경은 methylene blue로 청색입니다.
Kinyoun 염색항산균가열하지 않는 냉염색입니다. 결과 색은 Ziehl-Neelsen과 같습니다.
Auramine-rhodamine 염색항산균형광 현미경에서 밝은 황록색으로 보여 저배율 선별에 좋습니다.
India ink(인디아 잉크)Cryptococcus 협막음성 염색입니다. 어두운 배경에서 효모 주변에 투명한 후광(협막)이 보입니다.
아포 염색(Schaeffer-Fulton)세균 아포malachite green에서 아포는 녹색, 영양형 세포는 safranin으로 적색입니다.
Lactophenol cotton blue사상균 현미경 관찰균사와 분생포자가 청색으로 보입니다.
Calcofluor white진균 세포벽(chitin)형광 현미경에서 밝은 청백색으로 보입니다.
GMS(Gomori methenamine silver)진균, Pneumocystis진균 벽이 검게 염색되고 배경은 연한 녹색입니다.

(2) 조직과 세포

염색법대상결과
H&E조직 전반hematoxylin은 핵을 청자색, eosin은 세포질과 교원섬유를 분홍색으로 염색합니다.
PAS글리코겐, 중성 점액, 기저막, 진균 벽자홍색(magenta)입니다. diastase를 먼저 처리하면 글리코겐만 사라집니다.
Alcian blue산성 점액청색입니다.
Masson trichrome교원섬유와 근육 구분교원섬유는 청색 또는 녹색, 근육과 세포질은 적색입니다.
Van Gieson교원섬유교원섬유는 적색, 근육은 황색입니다.
Reticulin 은염색세망섬유검은색입니다.
Fontana-Masson멜라닌은을 환원시켜 검은색으로 보입니다.
Prussian bluehemosiderin의 철청색입니다.
Congo redamyloid적색으로 보이고, 편광 현미경에서 apple-green 복굴절을 보입니다.
Oil red O중성 지방동결 절편에서 적색으로 보입니다. 파라핀 처리를 하면 지질이 녹아 쓰지 못합니다.
Papanicolaou 염색세포검사(자궁경부 등)핵은 청자색, 각화된 세포질은 오렌지색, 비각화 세포질은 청록색입니다.
Giemsa 염색혈액·골수 도말, Helicobacter핵은 자주색, 세포질은 청색 계열입니다.

📌 염색에서 자주 묻는 쌍

멜라닌은 Fontana-Masson, 철은 Prussian blue, amyloid는 Congo red, 진균은 GMS와 PAS입니다. 항산균은 적색, 그람음성균은 분홍색으로 둘 다 붉은 계열이므로 대상 균부터 구분합니다.

확인할 점

  • 배지 조성, 첨가제 농도, 집락 색은 제조사와 기관 지침에 따라 다를 수 있습니다. 위 내용은 국시 수준의 일반 원칙입니다.
  • 염색 시간과 시약 농도는 기관마다 다릅니다. 이 글에서는 결과 색과 원리만 다룹니다.

출처

  • 임상미생물학과 조직검사학 국시 교재의 일반 서술을 바탕으로 정리했습니다. 개별 수치의 판본별 차이는 확인 필요 항목입니다.

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