(1) 확인시험과 순도시험

① 확인시험의 방법

확인시험은 검체가 표시된 성분인지 판정하는 시험으로 정성반응과 자외가시부흡수스펙트럼, 적외흡수스펙트럼, 박층크로마토그래피가 대표적이다.

정성반응은 특정 이온이나 작용기의 침전과 발색을 보는 방법이고, 자외가시부흡수스펙트럼은 최대흡수파장의 위치와 흡광도비로 판정한다.

적외흡수스펙트럼은 작용기 진동 흡수 위치가 물질마다 고유해 표준품 스펙트럼과 겹쳐 보아 동일성을 확인한다.

박층크로마토그래피는 검체와 표준액 반점의 이동거리 비가 일치하는지로 판정하며 확인시험과 순도시험에 함께 쓰인다.

② 순도시험 항목

순도시험은 목적 성분 이외 혼재물의 한도를 정하는 시험으로 중금속과 비소, 염화물, 황산염, 유연물질, 잔류용매를 다룬다.

중금속시험은 발색시킨 검체액의 색을 납 표준액과 비교하는 한도시험이고, 비소시험은 발생시킨 비화수소의 정색 정도로 판정한다.

염화물과 황산염 시험은 각각 질산은과 염화바륨으로 생긴 백탁을 표준액과 비교하며, 유연물질은 원료 유래 부산물과 분해산물을 뜻한다.

잔류용매(ICH Q3C) 클래스 1, 2, 3 분류는 사용을 피해야 하는 것, 사용을 제한하는 것, 독성이 낮은 것 순으로 위해도가 감소한다.

③ 순도시험 주요 항목 정리표

(2) 정량법과 계통적합성

① 정량법의 분류

정량법은 용량분석(적정)과 중량분석 같은 고전적 방법과 액체크로마토그래피(HPLC), 기체크로마토그래피(GC), 자외부흡광도측정(UV) 같은 기기분석으로 나뉜다.

용량분석은 표준액 소비량으로 함량을 계산하므로 역가 보정이 필수이고, 중량분석은 침전물을 직접 칭량해 산출한다.

자외가시부흡광도측정법과 몰흡광계수는 흡광도가 농도와 액층 길이에 비례한다는 관계로 이어지며, 몰흡광계수가 클수록 감도가 증가한다.

② 액체크로마토그래피 계통적합성

액체크로마토그래피 계통적합성은 이론단수와 분리도, 대칭계수, 재현성으로 판정하며 규정값을 만족해야 본시험을 진행한다.

이론단수는 컬럼 효율의 지표로 값이 증가할수록 피크가 좁아지고, 분리도는 인접 두 피크가 떨어진 정도로 통상 1.5 이상을 요구한다.

대칭계수는 1에 가까울수록 좋고 1보다 크면 꼬리끌기, 1보다 작으면 앞쏠림을 뜻한다.

재현성은 표준액을 반복 주입했을 때 피크면적의 상대표준편차로 확인한다.

(3) 물리적 상수와 기기적 품질시험

① 건조감량·강열잔분과 수분측정법

건조감량과 강열잔분(회분) 시험은 짝으로 다루는데, 건조감량은 가열이나 감압으로 날아가는 수분과 휘발성분의 총량을 백분율로 나타낸다.

강열잔분은 검체를 태운 뒤 남은 무기물의 양을 재므로 감소량을 보는 건조감량과 방향이 반대다.

수분측정법의 대표인 칼피셔법은 물과 요오드의 정량적 반응을 이용해 수분만 선택적으로 정량하며 용량적정법과 전량적정법으로 나뉜다.

미량 수분에는 감도가 높은 전량적정법이 적합하고, 수분이 비교적 많은 검체에는 용량적정법이 적합하다.

② 물리적 상수와 pH 측정법

융점과 비점, 굴절률, 비선광도, 점도, 비중 측정은 물질의 순도와 동일성을 뒷받침하는 물리적 상수 시험이다.

비선광도는 광학활성 물질이 편광면을 회전시키는 정도여서 광학이성질체 판별에 쓰이고, 점도는 액상 제제의 흐름 저항을 나타낸다.

pH 측정법과 완충액 표준액은 짝을 이루어, 유리전극을 표준액으로 교정한 뒤 검체를 재며 표준액의 pH가 온도에 따라 변하므로 온도 보정이 필요하다.

③ 원소 불순물과 열분석

원자흡광광도법은 원자화된 원소가 고유 파장의 빛을 흡수하는 성질을 이용해 금속을 선택적으로 정량한다.

유도결합플라스마(ICP)에 의한 원소 불순물(ICH Q3D) 시험은 여러 원소를 동시에 고감도로 측정할 수 있어 관리 도구로 널리 쓰인다.

열분석 중 시차주사열량측정(DSC)은 흡열과 발열로 융해와 결정형 전이를 보고, 열중량분석(TGA)은 온도 상승에 따른 질량 감소를 본다.

결정형 확인은 엑스선회절(XRD)로 하며 같은 성분이라도 결정형이 다르면 용해도와 생체이용률이 달라진다.