(1) ICH Q2 기반 분석법 밸리데이션 파라미터

① 특이성과 선택성

국제조화회의 품질지침(ICH Q2)은 분석법 밸리데이션 파라미터로 특이성, 직선성, 정확성, 정밀성, 검출한계, 정량한계, 범위, 완건성을 제시한다.

특이성(specificity)은 목적 성분만을 가려내어 측정하는 능력이며, 불순물과 분해산물, 부형제가 함께 있어도 신호가 간섭받지 않아야 한다.

여러 성분을 서로 구별해 내는 폭넓은 개념을 선택성이라 하고, 강제분해시험으로 분해산물 피크가 주성분에서 분리되는지 확인한다.

불순물과 분해산물, 부형제 간섭 배제가 증명되지 않으면 정량값이 참값보다 높게 치우치므로 특이성은 나머지 파라미터의 전제가 된다.

② 직선성과 범위, 정확성

직선성(linearity)은 농도와 측정값이 비례하는 정도로, 검량선의 상관계수(r)가 0.99 이상이면 적합으로 판정한다.

검량선 범위(range)는 직선성과 정확성, 정밀성이 동시에 확보되는 상한 농도와 하한 농도 사이의 구간을 뜻한다.

정확성(accuracy)은 참값에 근접한 정도이며 표준품을 첨가해 얻은 회수율로 평가하고, 일반적으로 98~102%를 만족 기준으로 삼는다.

회수율이 기준보다 낮으면 추출 손실이나 용기 흡착을, 높으면 공존물질의 양의 간섭을 먼저 의심한다.

③ 정밀성과 검출한계·정량한계

정밀성(precision)은 반복 측정값이 흩어지지 않는 정도이며 상대표준편차(RSD)가 작을수록 정밀성이 높다.

한 분석자가 짧은 시간 안에 반복 측정하는 조건을 병행정밀성(repeatability)이라 한다.

같은 실험실에서 날짜와 분석자, 기기를 바꾸어 확인하면 실험실내정밀성(intermediate precision)이 된다.

다른 기관이 같은 시험법을 수행해 비교하면 실험실간정밀성(reproducibility)이며 공정서 수재와 분석법 이전에서 요구된다.

검출한계(LOD)와 정량한계(LOQ) 산출에는 신호대잡음비를 쓰는 S/N비 3:1과 10:1 또는 표준편차/기울기를 쓰는 방식이 인정된다.

④ 시험 목적별 요구 파라미터 정리표

(2) 시험 목적별 요구사항과 시험계 관리

① 확인시험·순도시험·정량법의 차이

확인시험은 성분의 존재 여부만 판정하므로 특이성만 필수이고 직선성이나 정확성은 요구되지 않는다.

정량형 순도시험은 특이성과 직선성, 정확성, 정밀성, 정량한계, 범위, 완건성을 모두 요구한다.

한도시험 형태의 순도시험은 특이성과 검출한계 확인으로 충분하며 정량한계는 요구되지 않는다.

정량법은 검출한계와 정량한계를 빼고 나머지를 요구한다는 점이 순도시험과 대비되는 시험 목적별 요구 파라미터의 차이다.

② 완건성과 계통적합성

완건성(robustness)은 이동상 조성과 pH, 컬럼 온도, 유속을 의도적으로 조금 변화시켜도 결과가 흔들리지 않는 성질이다.

완건성 평가에서 민감하다고 드러난 조건은 시험법 본문에 허용 폭을 못박아 통제한다.

계통적합성(system suitability)은 시험 당일 기기와 시험계의 작동을 확인하는 절차여서, 밸리데이션과 달리 시험할 때마다 반복한다.

이론단수와 분리도, 대칭계수, 반복 주입 재현성이 규정값을 만족해야 그날 데이터를 유효한 것으로 인정한다.

(3) 분석법 이전, 표준품 관리와 일탈 조사

① 분석법 이전과 미생물 시험법 밸리데이션

분석법 이전(method transfer)은 개발 부서의 시험법을 시험 실시 부서로 옮기는 절차이며 두 기관 결과의 동등성 확인이 목적이다.

동등성은 판정 기준을 미리 정한 뒤 비교시험이나 공동 밸리데이션으로 입증한다.

미생물 시험법 밸리데이션에서는 무균시험 적합성 시험으로 검체의 항균력이 지시균 발육을 억제하지 않음을 확인한다.

엔도톡신 간섭시험은 검체가 반응을 억제하거나 증강하지 않는 최대 희석 배수를 정하기 위해 수행한다.

② 표준품·표준액 관리와 OOS·OOT 조사

표준품은 순도가 규명된 기준 물질이어서 정확성과 검량선 신뢰도를 좌우하므로 지정 조건에서 보관하고 유효기한을 관리한다.

표준액 관리와 유효기한 설정에서는 조제일과 조제자, 농도, 사용 기한을 기록하고 기한이 지나면 반드시 재조제한다.

시험 결과 부적합(OOS)은 규격을 벗어난 값이고, 규격 외 경향(OOT)은 규격 안에 있으나 통상 추세에서 이탈한 값이다.

조사 절차는 실험실 오류를 먼저 규명하는 1단계에서 시작해 원인이 밝혀지지 않으면 제조 공정까지 확대하는 2단계로 진행한다.

분석기기 적격성평가(AIQ)는 설계와 설치, 운전, 성능 적격성으로 나뉘고, 데이터 무결성은 귀속성과 판독성, 동시성, 원본성, 정확성을 갖춘 기록을 요구한다.