(1) 멸균법의 분류와 조건

① 습열과 건열

고압증기멸균(121℃ 15분)은 포화수증기 잠열로 단백질을 응고시키며, 같은 온도에서 건열보다 살균력이 커 수용액과 유리·고무 기구에 쓴다.

건열멸균(160~180℃)은 고온 공기의 산화로 분말·유지성 기제에 쓰고 온도가 낮을수록 시간이 길며, 엔도톡신 분해에는 더 높은 온도가 필요하다.

② 비가열 멸균

방사선멸균 : 감마선·전자선 · 핵산 손상 · 최종 포장 상태 처리 가능

산화에틸렌가스멸균 : 알킬화 · 열에 약한 재료 · 잔류가스 제거 환기 필수

여과멸균(0.22 μm 막여과)은 열에 불안정한 용액에 쓰나 바이러스와 일부 마이코플라스마는 통과한다.

(2) 멸균 지표와 무균보증 전략

① D값·Z값·F0값과 SAL

D값은 생균수를 10분의 1로 줄이는 시간으로 클수록 내열성이 강하고, Z값은 D값을 10분의 1로 낮추는 온도 상승 폭이다.

F0값은 Z값 10℃ 전제로 열이력을 121℃ 등가 시간으로 환산한 값이며, 최종멸균에서 12 이상과 무균보증수준(SAL 10⁻⁶) 이하가 요구된다.

② 최종멸균과 무균조작법

최종멸균 vs 무균조작법(aseptic processing) : 전자는 밀봉 용기째 멸균해 보증이 확실한 1순위 · 후자는 무균 여과 후 무균 충전이라 공정 관리 의존도 높음

무균조작법은 배지충전시험(media fill)으로 검증하고, 청정도 등급(Grade A~D, ISO 14644) 부유입자수로 관리하며 노출 충전점은 Grade A다.

③ 멸균법 수치 기준 정리표

(3) 무균 관련 시험법과 용수 관리

① 무균시험법과 엔도톡신시험법

무균시험법(직접법 · 멤브레인여과법) 중 항균 성분 검체는 세척이 되는 멤브레인여과법이 적합하다.

엔도톡신시험법 : LAL 시약 · 젤화법은 겔 형성 · 비탁법은 탁도 · 발색법은 발색기질

발열성물질시험법은 토끼 체온 상승을 보는 시험으로 엔도톡신시험법으로 대체되는 추세다.

② 주사용수와 밸리데이션

주사용수(WFI)는 정제수를 증류 등으로 제조해 미생물과 엔도톡신을 엄격히 관리하고, 정제수 관리는 정체 구간 제거와 순환, 가열 저장으로 한다.

멸균공정 밸리데이션 : 설비 적격성 · 열분포와 열침투 시험 · 생물학적 지시제로 사멸 확인