컨텐츠 내용을 수정할 수 있습니다
pH 조절 액-액 추출은 목적 성분을 비이온형으로 만들어 유기용매층으로 옮기는 고전적 정제법이다.
약산성 약물은 pH를 pKa보다 두 단위 이상 낮추고 약염기성 약물은 그만큼 높여야 유기층 이행률이 상승한다.
역추출로 산성이나 염기성 수용액에 다시 옮기면 중성 방해물질을 효율적으로 제거할 수 있다.
고상추출(SPE)은 컨디셔닝, 로딩, 세척, 용출의 순서로 진행하며 역상이나 이온교환 흡착제를 목적에 맞게 고른다.
세척 용매의 세기가 지나치면 목적 성분까지 빠져 회수율이 감소하므로 용매 강도 조절이 성패를 가른다.
단백질 침전은 아세토니트릴이나 메탄올 같은 유기용매 또는 과염소산 같은 산을 가해 단백질을 응집시키는 간편한 방법이다.
단백질 침전은 빠르지만 정제도가 낮아 매트릭스가 남기 쉬운 반면 고상추출은 정제도가 높고 농축도 가능하다.
대표성 있는 검체 채취(sampling)는 로트 전체의 성질을 반영하도록 여러 지점에서 취해 혼합하는 것을 원칙으로 한다.
생체시료(혈장 · 전혈 · 뇨) 전처리에서 혈장은 항응고제를 넣고 원심분리로 얻으며, 전혈은 세포 성분을 포함하고 뇨는 희석 배수 변동이 크다.
동결-융해 안정성은 시료를 반복해 얼리고 녹였을 때 농도가 유지되는지 보는 항목으로 보통 세 번 반복해 평가한다.
여과는 미립자를 제거해 컬럼 막힘을 막고, 원심분리는 침전물과 상등액을 물리적으로 나눈다.
이동상 탈기는 용존 기체로 생기는 기포와 검출기 잡음을 줄여 기준선을 안정시킨다.
희석과 정용은 검체 농도 조정의 기본 조작이며 정용은 표선까지 맞추어 최종 부피를 확정하는 절차다.
내부표준물질 첨가는 전처리 손실과 주입량 편차를 보정하려는 조작이며 목적 성분과 물성이 비슷한 물질을 고른다.
매트릭스 효과는 공존 성분이 이온화를 억제하거나 증강시켜 응답을 왜곡하는 현상으로 질량분석에서 특히 크게 나타난다.
매트릭스 효과 제거와 평가는 정제도 높은 전처리와 함께 순용매 표준과 매트릭스 첨가 표준의 응답 비교로 수행한다.
안정동위원소로 표지한 내부표준물질을 쓰면 억제와 증강이 함께 상쇄되어 정량 정확도가 상승한다.
유도체화는 휘발성이나 검출감도가 부족한 성분을 분석에 적합한 형태로 바꾸는 조작이다.
실릴화는 수산기나 카복실기의 활성수소를 트리메틸실릴기로 치환해 기체크로마토그래피 적합성을 높인다.
아실화는 아민이나 수산기에 아실기를 도입해 안정성을 올리고, 형광표지는 형광단을 붙여 검출한계를 낮춘다.
| 방법 | 정제도 | 특징 |
|---|---|---|
| 단백질 침전 | 낮음 | 신속하나 매트릭스 잔존 |
| 액-액 추출 | 중간 | pH 조절이 핵심 |
| 고상추출(SPE) | 높음 | 농축과 정제 동시 |
| 유도체화 | 해당 없음 | 검출성 개선 목적 |
다음 이론을 계속 학습하려면 로그인하세요.
로그인하고 계속 학습필기노트, 하이라이터, 메모는 잘 쓰고 있어?
내보내줘운영진이 검토할게요!
마이페이지에서 차단한 회원을 관리할 수 있어요.