(1) 화학반응을 이용한 확인

① 불꽃반응과 무기이온 확인시험

불꽃반응은 알칼리금속과 알칼리토금속이 특유의 불꽃색을 내는 성질을 이용하며 나트륨은 노란색, 칼슘은 등적색을 낸다.

무기이온 확인시험에서 염화물은 질산은과 흰 침전을, 황산염은 염화바륨과 흰 침전을 만드는 침전반응으로 확인한다.

철은 티오시안산염과 붉은 정색반응을 보이고, 암모늄은 알칼리 조건에서 가온할 때 나오는 암모니아로 확인한다.

침전반응과 정색반응은 생성물의 색과 용해성을 근거로 하므로 시액 조성과 pH 조건을 반드시 함께 확인한다.

② 관능기 정색반응

페놀성 수산기는 염화철 시액과 청색에서 자색에 이르는 정색반응을 나타낸다.

케톤과 알데하이드는 2,4-다이나이트로페닐하이드라진(2,4-DNP)과 노란색에서 주황색 침전을 만든다.

일차아민과 아미노산은 닌히드린과 가열하면 청자색을 띠고, 알칼로이드는 드라겐도르프 시액에서 등적색 침전을 준다.

관능기 정색반응은 특이도가 낮으므로 단독 판정보다 기기적 확인시험과 조합해 결론을 낸다.

③ 관능기 정색반응 요약표

(2) 물리상수와 기기적 확인

① 물리상수에 의한 확인

융점측정법은 시료가 녹기 시작해 완전히 녹을 때까지의 온도 범위를 재며 순도가 낮을수록 범위가 넓어지고 융점은 하강한다.

응고점은 액체가 굳는 온도이고, 굴절률과 비중은 액상 원료의 동일성 확인에 널리 쓰인다.

비선광도는 광학활성 물질이 편광면을 회전시키는 정도를 규정 조건으로 환산한 값이므로 부호와 크기를 함께 판정한다.

이들 물리상수는 값 자체를 절대적으로 보기보다 규정 범위 안에 드는지로 적부를 정한다.

② 스펙트럼과 크로마토그래피 확인

적외흡수스펙트럼 대조에 의한 확인은 표준품 스펙트럼과 흡수 위치가 일치하는지를 보는 방법으로 특이도가 매우 높다.

자외부에서는 UV 최대흡수파장의 위치와 서로 다른 두 파장에서의 흡수극대비를 규정 범위와 비교해 판정한다.

TLC Rf 비교 확인시험은 시료와 표준품의 이동거리 비가 같은지를 보고, HPLC 머무름시간 일치 확인은 동일 조건에서 피크가 같은 시간에 나오는지를 본다.

어떤 방법이든 표준품과의 대조가 전제이며, 머무름시간 일치만으로 동일성을 단정하기 어려워 스펙트럼 정보를 함께 활용한다.

③ 확인시험 설계와 판정

확인시험은 특이도가 서로 다른 방법을 조합해 설계하며 화학반응 시험과 기기 시험을 함께 배치하는 것이 일반적이다.

표준품과의 대조는 확인시험의 공통 원칙이므로 규정이 있는 항목에서는 시료와 표준품을 같은 조건에서 함께 조작한다.

정성분석은 성분의 존재 여부를 가리는 것이 목적이라 함량을 산출하는 정량법과 요구되는 정밀도의 성격이 다르다.

규정된 확인시험 가운데 하나라도 기준에 어긋나면 해당 품목은 확인시험 부적합으로 판정한다.