(1) 세포 기반 및 무세포 투과시험

① Caco-2 단층막 투과시험과 TEER

Caco-2 단층막 투과시험은 사람 대장암 세포를 분화시켜 소장 상피 유사 밀착연접과 수송체를 갖춘 막에서 투과를 보며, TEER가 낮으면 막이 새는 상태라 결과를 신뢰할 수 없다.

양방향 투과로 배출비를 구해 유출수송체 기질 여부를 판정하고, MDCK-MDR1 세포는 사람 P-gp 과발현계로 배양기간이 짧아 신속하다.

② PAMPA, Ussing chamber, in situ 장관관류법

PAMPA는 인공 지질막 무세포 시험이라 수동확산만 반영하고, Ussing chamber는 적출 장관 조직, in situ 장관관류법은 혈류가 유지된 마취 동물 장관 분절 관류로 흡수속도를 구한다.

예측력은 조직계 · 준생체계가 높고 처리량은 PAMPA가 크다.

③ 투과시험법 비교표

(2) 방출·용출 시험과 상관성 평가

① Franz diffusion cell, 투석막, 회전셀 방출시험

Franz diffusion cell은 피부나 인공막을 끼워 경피제제를, 투석막법은 나노입자 · 에멀젼에서 유리약물만 통과시켜 방출량을, 회전셀 방출시험은 이식형 등 특수 제형을 평가한다.

이때도 수용부 sink condition을 유지해야 방출속도가 과소평가되지 않는다.

② 용출시험 조건과 IVIVC, f2 비교

용출시험 조건과 방출속도 해석 : 회전속도 · 매질 pH · 계면활성제 첨가를 고정해 비교 · 0차 · 1차 · Higuchi 중 어느 양상인지로 기전 추정

in vitro-in vivo 상관성 평가는 점대점 대응이 최고 단계이고, 방출 프로파일 비교(f2)는 50 이상 100 이하이면 유사로 판정한다.

(3) 단백결합 측정법의 구분

① 평형투석, 동적투석, 한외여과, 초원심분리

단백결합 측정 : 평형투석은 표준법이나 시간 소요 · 동적투석은 비평형 해석으로 속도론 정보 · 한외여과는 빠르나 막 흡착 시 왜곡 · 초원심분리는 흡착 없으나 침강 · 온도 영향