미생물의 배양 멸균과 소독 | 마이메르시 MyMerci
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미생물의 배양 멸균과 소독

5. 미생물의 배양·멸균과 소독

[약품미생물학]

(1) 배지, 정량, 무균조작

① 선택배지와 감별배지

선택배지는 억제제로 목표 균만 키우고, 감별배지는 대사 산물 차이를 색으로 드러내 균을 구별한다.

MacConkey 한천은 담즙산염으로 그람양성균을 억제하며 젖당 분해 시 분홍 집락을 내는 선택 · 감별 겸용, 혈액한천은 알파 · 베타 · 감마 용혈을 구분한다.

임상 검체는 순수배양이라야 동정과 감수성 검사 결과를 신뢰할 수 있다.

② 집락 계수와 무균시험

집락형성단위(CFU)는 총균수가 아닌 생균수이며 단계 희석으로 평판당 집락 수를 맞춘다.

무균조작은 작업 중 오염을 막는 기법, 무균시험은 최종 제품의 무균 확인이나 표본검사여서 전량을 보증하지 못한다.

(2) 멸균법과 소독제

① 멸균법 비교

습열멸균은 고압증기 121℃ 15분이 표준으로 효율이 가장 높고, 건열멸균은 160~180℃로 더 높은 온도 · 긴 시간이 필요해 유리기구 · 분말 · 유지류에 쓴다.

열에 약한 용액은 0.22 μm 여과멸균(바이러스는 통과) · 포장 기구는 방사선멸균 · 열과 습기에 약한 기구는 산화에틸렌(EO) 가스멸균 후 잔류 가스 제거 필수

② D값, Z값, F0값

D값은 생균수를 10분의 1로 줄이는 시간으로 클수록 저항성이 크고, Z값은 D값을 10분의 1로 줄이는 온도 상승 폭이다.

F0값은 121℃ 습열 등가 처리 시간으로 증가할수록 멸균 보증 수준이 높아진다.

③ 소독제 분류와 사용

소독제 분류 : 알코올(에탄올 70% 최대 · 무수는 감소) · 염소계 · 요오드계(유기물 시 효력 감소) · 4급암모늄(저수준 · 아포 무효)

글루타르알데하이드 · 과산화수소는 아포까지 죽여 고수준 소독에 쓰이고, 소독수준은 고 · 중 · 저수준이다.

페놀계수는 페놀 대비 살균력으로 1 초과면 강하고, 방부제와 보존제는 정균 목적, 손위생에는 잔류 효과가 긴 클로르헥시딘이 유리하다.

④ 멸균법 조건 정리표

방법조건적용 대상
습열멸균121℃ 15분수용액, 배지, 기구
건열멸균160에서 180도유리, 분말, 유지
여과멸균0.22 μm열에 약한 용액
방사선멸균감마선 조사포장 일회용품
EO 가스멸균저온 가스, 잔류 제거내시경, 플라스틱

📌 실전 체크 포인트!

수치: 고압증기멸균의 표준 조건은 121℃ 15분이고 여과멸균의 표준 공극은 0.22 μm다.

감별: D값은 시간 단위, Z값은 온도 단위, F0값은 121℃ 등가 시간이라는 단위 구분이 핵심이다.

방향: 에탄올은 70% 부근이 최적이며 농도가 100%로 올라가면 살균력이 오히려 감소한다.

감별: MacConkey 한천은 선택배지와 감별배지 성격을 동시에 가지므로 한쪽으로만 답하지 않는다.

암기 대구: 4급암모늄은 저수준, 알코올과 요오드계는 중수준, 글루타르알데하이드와 과산화수소는 고수준 소독제다.

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