조직검사학 2부

1. 다당류 및 점액물질의 염색

a. 핵심 개념

PAS 반응은 글리코겐·다당류를 적자색으로 염색, diastase 대조로 글리코겐 증명.
점액·철은 전용 염색법으로 구별.

b. 상세 설명

탄수화물·점액 염색

표적	염색법	색
글리코겐·다당류	PAS(과요오드산-쉬프)	적자색
점액	mucicarmine	적색
산성 점액다당류	alcian blue	청색

PAS 대조: diastase(아밀라제) 처리 후 소실되면 글리코겐 증명. 정상 간·뼈대근 글리코겐 확인. glycogen 고정: 무수알코올·카노이·포멀알코올 0~4℃. 실온·2 mm 이상 두께 시 이탈현상.

철 염색 비교

염색법	표적	색
Prussian blue	3가철	청색
Turnbull blue	2가철	청색
Quincke	3·2가철 동시	—

c. ★ 시험 포인트

글리코겐·다당류를 적자색으로 염색 → PAS 반응
글리코겐 증명용 대조 처리 → diastase(아밀라제) 처리 후 소실
산성 점액다당류를 청색으로 염색 → alcian blue
3가철을 청색으로 염색 → Prussian blue
2가철을 청색으로 염색 → Turnbull blue

d. 한 줄 요약

📌 한 줄 요약: PAS는 글리코겐·다당류를 적자색으로 물들이고 diastase 소실로 글리코겐을 증명하며, 철은 Prussian(3가)·Turnbull(2가) blue로 구별한다.

e. 핵심 키워드

핵심 키워드: PAS, diastase, mucicarmine, alcian blue, Prussian blue, Turnbull blue

2. 지질·병원미생물·내인성 색소 및 아밀로이드증 염색

a. 핵심 개념

지질은 동결절편에서 Sudan·Oil red O로 염색.
아밀로이드는 Congo red + 편광 사과녹색 복굴절로 확진.
색소·병원미생물은 전용 염색법으로 검출.

b. 상세 설명

지질 염색

의의: 지방·지질 확인(지방변성·지방색전).
고정·절편: 포르말-칼슘 고정 후 동결절편(파라핀은 지질 소실).
염색법: Sudan III·IV·Sudan black·Oil red O(적색·흑색).

유전분(아밀로이드) 염색

염색법	소견
Congo red	벽돌색
확진	편광현미경 사과녹색 복굴절

색소 염색

구분	색소	염색법
내인성	멜라닌	Fontana-Masson
내인성	헤모시데린(철)	Prussian blue
내인성	빌리루빈·리포푸신	—
외인성	탄분(폐)·문신 색소	—

병원미생물 염색

병원체	염색법	색/비고
세균	Gram	—
결핵균	Ziehl-Neelsen	항산성
곰팡이	PAS·GMS(은)	흑색
바이러스	봉입체 관찰	면역염색·전자현미경
나선균(매독균 Treponema pallidum)	Warthin-Starry법·Levaditi 도은법	호은성(argyrophilic) 흑색

살아있는 매독균 운동: 암시야현미경 관찰.

c. ★ 시험 포인트

지질염색을 위한 절편 종류 → 동결절편(파라핀은 지질 소실)
아밀로이드 확진 소견 → 편광현미경 사과녹색 복굴절(Congo red)
결핵균 염색법 → Ziehl-Neelsen(항산성)
조직 내 매독균 은염색 → Warthin-Starry법·Levaditi 도은법
멜라닌 색소 염색 → Fontana-Masson
헤모시데린(철) 염색 → Prussian blue

d. 한 줄 요약

📌 한 줄 요약: 지질은 동결절편 Sudan·Oil red O, 아밀로이드는 Congo red + 편광 사과녹색, 결핵균은 Ziehl-Neelsen, 매독균은 Warthin-Starry 은염색으로 검출한다.

e. 핵심 키워드

핵심 키워드: 동결절편, Sudan·Oil red O, Congo red, 사과녹색 복굴절, Ziehl-Neelsen, Fontana-Masson, Warthin-Starry

3. 면역조직화학염색

a. 핵심 개념

항원-항체 특이 결합으로 조직 내 특정 항원 위치를 색으로 표시.
직접법·간접법(ABC·PAP·중합체법)으로 구분, 간접법이 고감도.
형광항체법과 효소항체법은 검출·보존성이 다름.

b. 상세 설명

방법 분류: 직접법(표지항체 1개), 간접법(1차 항체 + 표지 2차 항체, 고감도), ABC·PAP·중합체법.

형광항체법 vs 효소항체법

구분	형광항체법	효소항체법
관찰	형광현미경 필요	광학현미경(퍼옥시다제·DAB)
감도·특성	감도 높음·퇴색	영구 보존 가능
표본 보존성	1~2주	반영구적

주요 단계: 항원 부활(열·효소) → 내인성 효소 차단 → 1차 항체 → 표지 2차 항체 → 발색 → 대조염색.

TEM 표본 처리

단계	조건
전고정	2.5% 글루타르알데히드(pH 7.4, 4℃)
후고정	1% 오스뮴
초박절	60~80 nm(반초박절 1 μm·톨루이딘블루)

c. ★ 시험 포인트

감도가 더 높은 면역조직화학법 → 간접법
영구 보존이 가능한 항체법 → 효소항체법(반영구적)
형광항체법 표본 보존 기간 → 1~2주
TEM 전고정액 → 2.5% 글루타르알데히드(pH 7.4, 4℃)
TEM 초박절 두께 → 60~80 nm

d. 한 줄 요약

📌 한 줄 요약: 면역조직화학은 항원-항체 결합으로 표적 위치를 표시하며, 간접법이 고감도, 효소항체법이 반영구 보존이 가능하다.

e. 핵심 키워드

핵심 키워드: 직접법·간접법, ABC·PAP, 형광항체법 12주, 효소항체법 반영구, 항원 부활, 초박절 6080 nm

4. 분자병리 및 전자현미경검사

a. 핵심 개념

블로팅은 표적 분자별(DNA·RNA·단백질)로 구분.
PCR·FISH·유세포분석으로 유전자·염색체·세포 분석.
TEM은 내부 미세구조(2차원), SEM은 표면 입체(3차원) 관찰.

b. 상세 설명

블로팅·분자검사 ★빈출

검사	표적
서던블로팅	DNA
노던블로팅	RNA
웨스턴블로팅	단백질
PCR	특정 DNA 증폭
FISH	형광 탐침, 염색체·유전자 위치·수 이상
유세포분석법(flow cytometry)	세포 표면표지자·DNA량 분석

TEM vs SEM

구분	TEM(투과)	SEM(주사)
원리	전자선이 얇은 절편 투과	표면에서 튀어나온 전자
관찰	내부 미세구조(2차원)	표면 입체(3차원)

c. ★ 시험 포인트

RNA를 검출하는 블로팅 → 노던블로팅
단백질을 검출하는 블로팅 → 웨스턴블로팅
염색체·유전자 수 이상을 형광 탐침으로 확인 → FISH
세포 표면표지자·DNA량을 하나씩 분석 → 유세포분석법(flow cytometry)
표면의 3차원 형태를 관찰하는 전자현미경 → SEM

d. 한 줄 요약

📌 한 줄 요약: 분자병리는 서던(DNA)·노던(RNA)·웨스턴(단백질) 블로팅과 PCR·FISH·유세포분석을 활용하며, TEM은 내부(2차원)·SEM은 표면(3차원)을 관찰한다.

e. 핵심 키워드

핵심 키워드: 서던·노던·웨스턴블로팅, PCR, FISH, flow cytometry, TEM 2차원, SEM 3차원

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