part3. 일반염색

(1) 염료의 화학적 구성

① 구성 요소

• 염료 = 벤젠 + 발색단(chromogen, 색 담당) + 조색단(auxochrome, 결합력 부여)
• 발색단: 이중결합이 포함된 기(-N=N-, -NO₂, C=O 등)
• 조색단: -NH₂, -OH, -COOH, -SO₃H 등, 조직과의 결합 능력 부여
• 매염제(mordant): 염료와 조직 사이를 연결하는 물질(alum, iron)

② 발색단 소실

• 백색염기(leucobase): 발색단이 환원되어 색을 잃은 상태
• PAS 염색의 시프 시약(Schiff reagent)이 대표적 백색염기
• 사용 가능 여부 검사: 포름알데히드 10 ㎖에 시약 몇 방울 → 즉시 진한 청색이면 정상, 연분홍색이면 변질

(2) 염료의 분류

① 산성·염기성·중성 염료

(1) 염색 과정과 원리

① 헤마톡실린(Hematoxylin)

• logwood 나무껍질에서 추출, 산화되면 헤마테인(hematein, C₁₆H₁₂O₆)이 됨
• 자체로는 염색능력이 없어 매염제(alum, iron)와 결합해야 핵을 염색
• 산화제: 산화제2수은(HgO), 요오드산나트륨(NaIO₃)으로 숙성을 촉진

② 에오신(Eosin)

• 세포질을 분홍~적색으로 염색하는 산성 염료

(2) 진행성·퇴행성 염색

① 진행성 염색(Progressive staining)

• 염색 정도를 현미경으로 관찰하면서 적당한 수준에서 멈추는 방법
• 메이어(Mayer's) 헤마톡실린, 질(Gill's) 헤마톡실린 사용

② 퇴행성 염색(Regressive staining)

• 먼저 과염색한 후 감별(탈색, differentiation) 과정으로 불필요 부분 제거
• 해리스(Harris') 헤마톡실린 핵염색에 사용
• 감별제: 산알코올(1% HCl + 70% alcohol)
• 청색화(bluing): 감별 후 수돗물·알칼리 용액(pH 8.0)으로 처리해 청색으로 변함