조직병리학

part1. 조직검체와 고정

(1) 생검과 육안검사

① 생검 종류

② 육안 검사 포매 방향

• 일반적으로 조직의 넓은 부위가 하향하도록 포매
• 관상조직(난관·충수돌기·혈관)은 횡단면(cross section)이 표면에 오도록 수직으로 세워 포매함(내강~장막층 전체 벽이 동심원으로 관찰되도록)
• 피부는 표피와 진피 부분이 다 나오도록 한 블록에 포매
• 위장관계는 점막층~장막층이 모두 나오도록 세워서 포매
• 침생검(간·신장·갑상선)은 크고 작은 순서로 나란히 포매

(1) 고정의 목적과 종류

① 고정의 5대 목적

• 보존효과: 자가융해(autolysis) 방지
• 치사작용: 세포 기능 정지
• 경화작용: 유동성 원형질 → 반고체화(sol → gel)
• 매염작용: 염색이 잘 되게 도움
• 광학적 분별작용(optical differentiation): 굴절률 변화로 조직 구조의 식별성 증가
• 참고: 침투작용은 고정의 목적이 아니라 고정액이 갖춰야 할 물리적 특성

(2) 주요 고정액

① 포르말린(Formalin, formaldehyde)

• 100% 포르말린은 포름알데히드(37~40%)가 물에 녹은 것임(10% 포르말린 = 3.7~4% 포름알데히드)
• 단백질 분자 사이에 메틸렌 교차결합(methylene bridge) 형성으로 고정
• 살균력·조직 침투력이 강하고 값이 싸 조직병리에서 가장 널리 사용
• 전자현미경 검사에는 미세구조 보존 불량으로 부적합

② 승홍(염화제2수은, HgCl₂)

• 유독성 백색 결정체, 중금속 고정제 중 가장 많이 사용
• 복합고정액: 젠커(Zenker), 헬리(Helly), 하이덴하인 수사, B5 용액
• 고정 후 승홍 색소 제거: 루골 아이오딘 → 5% sodium thiosulfate 처리

③ 피크린산(Picric acid)

• 고정제와 염색 모두에 사용하는 유일한 물질
• DNA를 가수분해하는 강한 산성물질 → DNA·RNA 염색 시 피해야 함
• 세포를 심하게 위축시키므로 단독 사용하지 않고 빙초산과 혼합
• 복합고정액: 부앙(Bouin), 두보스크-브라질 용액

④ 에탄올(Ethanol)

• 지방을 용해하며 단백질 응고·침투가 빠르지만 조직 위축·경화가 심함
• 고정과 동시에 탈수가 이루어짐
• 핵산·글리코겐 고정에 우수하나 지질 용해로 항산성 간균·수초 증명에 부적합
• 카르노이(Carnoy) 용액: 절대알코올 + 클로로포름 + 빙초산

⑤ 아세톤(Acetone)

• 효소(산성·알칼리 인산분해효소) 조직화학 증명에 사용
• 냉장온도(0~4℃)에서 고정, 동시에 탈수도 이루어짐
• 위축·변형·과경화에 주의