part6. 혈액학적 검사
(1) 항응고제와 채혈
| 항응고제 |
원리 |
용도·특징 |
| 헤파린 (Heparin) |
항트롬빈 |
삼투압취약성·혈액가스, 도말은 부적합(배경 청색) |
| 이디티에이 (EDTA) |
칼슘 착염 제거 |
CBC 적합, 적혈구침강속도는 2시간 내 검사 |
| 구연산나트륨 (Citrate 3.2%) |
칼슘 활성 방지 |
응고검사(9:1), 적혈구침강속도(4:1) |
| 이중수산염 (Double oxalate) |
칼슘 침전 제거 |
혈소판 응집 유발로 혈소판 수에 부적합 |
① 채혈
- 정맥채혈 부위는 정중주정맥(팔오금중간정맥)·요측피정맥
- 진공채혈관 순서(CLSI): 혈액배양(무균) → 구연산나트륨(파랑) → 혈청·분리관(빨강·노랑) → 헤파린(초록) → 이디티에이(보라) → 불화나트륨(회색)
- 실온 6시간 이상 방치 시 적혈구 팽창으로 적혈구용적·평균적혈구용적은 증가, 평균적혈구혈색소농도·적혈구침강속도는 감소
📌 실전 체크 포인트!
CBC 전용 항응고제: 이디티에이 (EDTA) / 응고검사: 구연산나트륨(혈액:항응고제 = 9:1)
용혈 원인: 기포, 압박대 2분 초과, 가는 바늘(22~23G), 무리한 흡인
(1) 혈색소 검사
① 측정법
- 시안메트헤모글로빈법: 드랍킨 용액 사용, 설프헤모글로빈은 측정되지 않는다(표준법)
- 산성헤마틴법: 0.1N 염산으로 황색 산성헤마틴 전환 후 비교
- 라우릴황산나트륨 (SLS)법: 자동혈구계산기에서 주로 이용
② 정상치
- 남자 13~18, 여자 12~16, 임산부 11~12, 신생아 17~19 g/㎗
(2) 적혈구용적 검사
① 측정법
- 윈트로브법은 3,000 rpm 30분, 미세적혈구용적법은 11,000~12,000 rpm 5분(헤파린 모세관)
- 정상치 남자 40~48%, 여자 36~45%이며 수기법이 자동법보다 약간 높음
(1) 적혈구·백혈구·혈소판 계산
| 항목 |
희석액·특징 |
정상치 |
| 적혈구 (RBC) |
등장 희석액(헤이엠·토이손·0.85% 식염수) |
남 4.5~5.5·여 4.0~5.0 ×10⁶/㎕ |
| 백혈구 (WBC) |
투르크액(빙초산 용혈·젠티안바이올렛 핵염색) |
4~10 ×10³/㎕ |
| 혈소판 (PLT) |
직접법(1% 수산암모늄), 간접법(포니오) |
150~350 ×10³/㎕ |
| 호산구 |
랜돌프·힌켈만액 |
70~440/㎕ |
① 백혈구 교정
- 감별 시 백혈구 100개당 유핵적혈구가 10개 이상이면 교정
- 교정 백혈구 수 = 교정 전 백혈구 수 × 100 / (유핵적혈구 수 + 100)
📌 실전 체크 포인트!
백혈구 희석액은 적혈구를 용혈(빙초산), 유핵적혈구는 백혈구로 계산되어 교정 필요
호산구는 아침에 가장 낮고 야간에 가장 높음(쏜 검사)
(2) 그물적혈구 계산
① 의의와 염색
- RNA를 함유한 어린 적혈구로 골수 적혈구 조혈능력의 지표
- 초생체염색: 뉴메틸렌블루, 브릴리언트크레실블루
- 정상치 성인 0.5~1.5%, 신생아 2~6%
② 그물적혈구 생성지수 (RPI)
- 교정 그물적혈구 백분율 ÷ 말초혈액 성숙기간이며 건강한 정상인은 1.0
- 빈혈 환자에서 2.0 초과는 골수 반응 양호(용혈빈혈·급성출혈), 2.0 미만은 조혈 장애(철결핍·재생불량빈혈)를 의미
📌 실전 체크 포인트!
정상인 RPI는 1.0, 2.0은 빈혈 환자의 골수 반응 평가 기준점("정상치 2.0" 함정 주의)
(1) 평균적혈구 지수
| 지수 |
공식 |
정상치 |
| 평균적혈구용적 (MCV) |
적혈구용적(%) × 10 / 적혈구 수 |
80~100 fL |
| 평균적혈구혈색소량 (MCH) |
혈색소 × 10 / 적혈구 수 |
28~32 pg |
| 평균적혈구혈색소농도 (MCHC) |
혈색소 × 100 / 적혈구용적 |
32~36 g/㎗ |
| 적혈구분포폭 (RDW) |
적혈구 히스토그램 산출 |
11.5~14.5% |
① 임상 의의
- 평균적혈구용적 증가는 거대적혈모구빈혈, 감소는 철결핍·지중해·철적혈모구빈혈
- 평균적혈구혈색소농도 증가는 선천성 구형적혈구증, 감소는 저색소성 빈혈
- 적혈구분포폭은 대소부동증의 지표이며 프라이스-존스 곡선은 직경 분포
(1) 도말과 염색
① 도말
- 쐐기법(박층은 일반혈액, 후층은 기생충), 커버슬립법을 씀
- 도말 길이는 슬라이드의 3/4~2/3, 각도 25~30도이며 각도가 크거나 빠르면 두껍고 짧아짐
② 염색
- 라이트염색: 과립 염색 양호, 고정 과정 불필요
- 김자염색: 핵 염색 양호, 고정 필요, 원충류 검사에 적합
- 완충액 pH 6.4~6.8이며 알칼리성이면 청색, 산성이면 적색으로 치우침
📌 실전 체크 포인트!
라이트염색은 고정 불필요·과립 양호, 김자염색은 고정 필요·핵과 원충 양호
도말이 알칼리·과염색·두꺼우면 청색, 산성·과세척이면 적색
(2) 자동혈구분석
① 원리
- 전기저항법(쿨터계수기), 고주파법, 광산란법(흐름세포측정)을 이용
- 직접 측정 항목은 적혈구·혈색소·백혈구·혈소판이며 적혈구분포폭·적혈구용적은 계산
(1) 세포화학염색
| 염색 |
양성 세포·물질 |
임상 의의 |
| 과산화효소 (MPO)·수단블랙비 (SBB) |
골수계 과립 |
모구 3% 이상 양성이면 골수성 백혈병 |
| 과아이오딘산 시프 (PAS) |
글리코겐 |
급성림프모구백혈병·적백혈병(M6) 양성 |
| 백혈구알칼리인산분해효소 (LAP) |
성숙 호중구 |
유백혈병반응 증가, 만성골수백혈병·발작야간혈색소뇨증 감소 |
| 주석산내성산성인산분해효소 (TRAP) |
털세포 |
털세포백혈병 양성 |
| 프러시안블루 (Prussian blue) |
철 |
철적혈모구·파펜하이머소체 확인 |
📌 실전 체크 포인트!
골수계 표지: 과산화효소·수단블랙비 / 림프계·적백혈병 표지: 과아이오딘산 시프
백혈구알칼리인산분해효소(LAP): 유백혈병반응 증가 vs 만성골수백혈병 감소로 감별
(1) 도말 작성 세부 절차
① 쐐기법 단계
- 신선혈 또는 EDTA 혈액 한 방울을 슬라이드 한쪽 끝에 놓음
- 스프레더 슬라이드를 25~30도 각도로 기울여 혈액 방울에 접촉
- 일정한 속도로 밀어서 도말 → 길이 슬라이드의 2/3~3/4
- 완전히 건조 후 메탄올로 고정(2분) → 염색
- 두꺼운 도말: 각도 크거나 속도 느림 / 얇은 도말: 각도 작거나 속도 빠름
② 라이트-김자(Wright-Giemsa) 염색 절차
- 도말을 메탄올로 고정 → 라이트 원액을 도말 위에 도포(2분)
- 동량의 완충액(pH 6.4~6.8)을 가해 혼합(4분)
- 흐르는 물로 세척 → 건조 → 경검
- 염색 이상 원인: 너무 청색(알칼리 완충액·과염색·두꺼운 도말) / 너무 적색(산성 완충액·과세척)
📌 실전 체크 포인트!
쐐기법 각도 25~30도, 길이 슬라이드 2/3~3/4
라이트염색 완충액 pH 6.4~6.8 / 청색 치우침: 알칼리성·두꺼운 도말
(2) CBC 판독 기준과 이상결과 확인
① 정상 참고치
| 항목 |
남자 |
여자 |
| 백혈구(WBC) |
4.5~11.0 ×10³/μL |
4.5~11.0 ×10³/μL |
| 적혈구(RBC) |
4.5~6.0 ×10⁶/μL |
4.0~5.5 ×10⁶/μL |
| 혈색소(Hb) |
13~17 g/dL |
12~16 g/dL |
| 적혈구용적(Hct) |
40~52% |
36~48% |
| 혈소판(PLT) |
150~400 ×10³/μL |
150~400 ×10³/μL |
| 망상적혈구 |
0.5~2.0% |
0.5~2.0% |
② 이상결과 확인(reflex) 기준
- 말초혈액 도말 경검 필수 상황: 자동분석기에서 모구·블라스트 flag, WBC 비정상 분류, PLT <100 또는 >1000, Hb <7 또는 >20, 백혈구 감별이 불일치할 때
- 적혈구 형태 이상 확인: 낫형·표적·분열적혈구·적혈구봉입체 등 직접 도말 확인 필수
📌 실전 체크 포인트!
모구(blast) flag → 반드시 도말 경검 / PLT <100 또는 자동분석 불일치 시 도말 확인
Hb 남자 13~17·여자 12~16 / WBC 4.5~11.0 ×10³/μL
(3) 골수검사 절차와 판독
① 골수천자 부위와 절차
- 성인 주 천자 부위: 위앞엉덩뼈가시(전상장골극), 복장뼈(흉골)
- 영아: 정강뼈(경골) 앞면
- 채취 후 즉시 도말 → 공기건조 → 라이트-김자 염색
② 골수 판독 기준
| 항목 |
정상 범위 |
| 골수세포충실도 |
30~70%(연령에 따라 감소) |
| M:E 비(골수계:적혈구계) |
3:1~5:1 |
| 모구(blast) 비율 |
5% 미만 |
| 원시적혈모구 |
1% 미만 |
| 형질세포 |
3% 미만 |
③ 주요 판독 포인트
- M:E 비 증가: 적혈구 생성 감소(재생불량성빈혈) 또는 골수계 증식(만성골수백혈병)
- 모구 5% 이상: 이형성증후군(MDS) 의심 / 20% 이상: 급성백혈병 기준
- 형질세포 10% 이상: 다발성골수종
📌 실전 체크 포인트!
M:E 비 정상 3:1~5:1 / 모구 20% 이상 → 급성백혈병 진단 기준
골수천자 주 부위: 위앞엉덩뼈가시(전상장골극)
(4) 염색체·유세포분석
① 유세포분석(흐름세포측정, flow cytometry)
- 세포 표면 항원(CD 표지자)을 형광 항체로 표지 후 레이저로 계측
- 백혈병·림프종 면역표현형 분류에 사용
- 주요 CD 표지자: CD3(T세포)·CD19·CD20(B세포)·CD34(조혈모세포)·CD33(골수계)
② 염색체 검사
- G분염법(GTG법): 가장 많이 사용, 밝은 띠·어두운 띠로 염색체 식별
- 핵형분석(karyotype): 46,XX / 46,XY 등 표기
- 주요 이상: t(9;22) 필라델피아 염색체(만성골수백혈병), t(15;17) 급성전골수구백혈병
📌 실전 체크 포인트!
CD34: 조혈모세포 / CD3: T세포 / CD19·CD20: B세포 / CD33: 골수계
필라델피아 염색체 t(9;22): 만성골수백혈병의 특징적 소견
(1) 이상 혈색소 검사
| 검사 |
방법·특징 |
| 낫적혈구 검사 |
메타중아황산나트륨법(산소결핍 시 낫형 변형) |
| 태아혈색소 (HbF) 검사 |
알칼리변성법·산용출법, HbA보다 느림 |
| 혈색소H (HbH) 검사 |
초생체염색 시 청색 봉입체 |
| 당화혈색소 (HbA1c) |
고속액체크로마토그래피, 총 혈색소의 5.3~7.5% |
| 혈색소 이상 확인 |
전기영동법 |
📌 실전 체크 포인트!
태아혈색소(HbF)는 산소친화력이 높고 전기영동에서 HbA와 HbC 중간에 위치
혈색소 이상 최종 확인검사: 전기영동법