임상화학
part1. 기초 임상화학
(1) 혈장과 혈청
① 혈장 (Plasma)
- 항응고제를 첨가한 검체로 섬유소원 (Fibrinogen)을 함유하며 섬유소 (Fibrin)는 없음
- 생체정보를 가장 정확히 반영
② 혈청 (Serum)
- 항응고제가 없고 섬유소원은 없으며 섬유소는 함유
- 임상화학에서 실제 검체로 가장 많이 사용
③ 검체 불량 요인
- 용혈 (Hemolysis), 황달혈청 (Icteric), 고지방 혼탁혈청 (Lipemic)이 대표적
- 혈색소 (Hb) 30 ㎎/㎗ 초과 시 육안적 용혈로 판정
(2) 채취조건별 성분 변화
| 조건 |
증가 |
감소 |
| 용혈 |
LDH, Aldolase, Fe, ACP, AST, K, ALT |
Bilirubin |
| 식사 후 |
Glucose, Lipid, TG |
NEFA, K, P |
| 운동 후 |
Lactic·Pyruvic acid, CK, ALP, AST, ALT, LDH |
Glucose, TG |
| 혈액 방치 |
Ammonia, pH, CO₂, Met-Hb, HCO₃⁻, Lactic acid |
O₂, Bilirubin, Glucose |
① 성별·연령 변동
- 남자가 높음: 17-케토스테로이드 (17-KS), 17-하이드록시코르티코스테로이드 (17-OHCS), 철 (Fe), 혈색소 (Hb), 요산 (Uric acid)
- 여자가 높음: 크레아틴 (Creatine), 콜레스테롤 (Cholesterol), 총철결합능 (TIBC), 불포화철결합능 (UIBC)
- 성인보다 유아가 높음: 크레아틴, 알칼리인산분해효소 (ALP, 100배), LDH, AST, ALT, P
② 자세·광선 변동
- 직사광선 불안정: 빌리루빈 (Bilirubin), 포르피린 (Porphyrin), 유로빌리노겐 (Urobilinogen)
- 서 있을 때가 높음: 총단백질, 알부민, 칼슘, LDH, 콜레스테롤, ALP
- 실온 안정 효소: LDH, ACP, 아밀라아제, ALP, 이소시트르산탈수소효소 (ICD)
📌 실전 체크 포인트!
미분리 방치: 밀폐 → 암모니아 증가, 개방 → 암모니아 감소
정맥혈 > 동맥혈: CO₂, 젖산·피루브산 / 정맥혈 < 동맥혈: 포도당, O₂, pH
(3) 항응고제와 검체 구별
| 항응고제 |
원리 |
용도 |
| 헤파린 (Heparin) |
항트롬빈 |
혈액가스·pH·젖산·암모니아 / 첨가량 최소 |
| 이디티에이 (EDTA) |
탈칼슘 |
혈구검사 / 전해질 측정불가 |
| 수산나트륨·칼륨 (Oxalate) |
탈칼슘 |
응고검사 / LDH 저해 |
| 수산리튬 (Li oxalate) |
탈칼슘 |
크레아티닌·요산 |
| 이중수산염 (Double oxalate) |
탈칼슘 |
혈구검사 / 전해질·비단백질소 측정불가 |
| 불화나트륨 (NaF) |
칼슘 해리 약화 |
포도당 정량 필수 / 효소측정 불가 |
| 구연산나트륨 (Citrate) |
칼슘 작용 약화 |
응고·적혈구침강 / 구연산:혈액=1:9 |
① 검체 구별
| 성분 (㎎/㎗) |
혈청 |
요 |
양수 |
| 단백질 |
6000~8000 |
10~20 |
20~1700 |
| 요소 |
4~18 |
100~200 |
5~14 |
| 크레아티닌 |
0.5~1.0 |
66~130 |
0.5~1.7 |
📌 실전 체크 포인트!
첨가량이 가장 적은 항응고제: 헤파린 (Heparin)
포도당 정량 필수: 불화나트륨 (NaF) / 응고검사: 구연산나트륨 (1:9)
(1) 단위와 농도
① 에스아이 접두어 (SI)
- T(10¹²), G(10⁹), M(10⁶), k(10³) / d(10⁻¹), c(10⁻²), m(10⁻³), μ(10⁻⁶), n(10⁻⁹), p(10⁻¹²)
- 1 m = 10⁶ ㎛ = 10⁹ ㎚, 1 ℓ = 10³ ㎖, 1 ㎏ = 10⁶ ㎎, 1 λ = 1 ㎕
② 농도
- 몰농도 (M): 용액 1 L 중 용질 몰수 / 몰랄농도 (m): 용매 1 ㎏ 중 몰수, 온도에 무관
- 노르말농도 (N) = 몰농도 × 원자가 / 당량 = 분자량 ÷ 원자가
- 수소이온농도 (pH) = −log[H⁺], pH + pOH = 14, 중화적정 NV = N'V'
(2) 완충액과 지시약
| 완충액 |
pH |
용도 |
| 바르비탈 (Barbital) |
8.6 |
전기영동 |
| 인산 (Phosphate) |
7.0 |
중성 |
| 트리스티몰 (Tris-thymol) |
7.55 |
티몰혼탁검사 |
| 숙신산 (Succinate) |
4.2 |
비시지 (BCG) |
| 구연산 (Citrate) |
4.8 |
산성인산분해효소 (ACP) |
| 지시약 |
pH 범위 |
산 → 염기 |
| 메틸오렌지 (Methyl orange) |
3.1~4.4 |
적 → 황 |
| 메틸레드 (Methyl red) |
4.2~6.3 |
적 → 황 |
| 페놀레드 (Phenol red) |
6.8~8.4 |
황 → 적 |
| 페놀프탈레인 (Phenolphthalein) |
8.3~10.0 |
무색 → 적 |
📌 실전 체크 포인트!
전기영동 완충액: 바르비탈 (Barbital, pH 8.6)
강산 지시약: 메틸오렌지·메틸레드 / 강알칼리 지시약: 페놀프탈레인·티몰블루
(1) 표준물질과 기구
① 1차 표준물질
- 직접 칭량하여 용액 제조가 가능하며 순도 99.95% 이상, 비흡습성, 물에 잘 녹고 105~110℃ 건조 안정해야 함
- 2차 표준물질은 액체이며 1차 표준물질로 적정하여 농도를 정함
② 물과 건조제
- 물 정제는 1형 (3차, 10 ㏁, 특수검사·표준물질용)을 쓰고 순도검정은 전기전도도로 함
- 건조제: 오산화인 (P₂O₅, 가장 우수·표준물질 제조), 황산칼슘 (CaSO₄, 가장 많이 사용)
- 시약병 색: 검정 독약, 빨강 극약, 파랑 일반시약
③ 용량기구와 특수시험관
- 수용 (TC): 용량플라스크·메스실린더 / 출용 (TD): 피펫·뷰렛
- 볼류메트릭 피펫 (중앙 팽대·TD), 오스트발트-폴린 피펫 (점조 혈청용·하단 팽대), 마이크로 피펫 (1 ㎕·TC)
- 특수시험관: 폴린-우 (포도당), 비단백질소 (NPN), 니슬 (뇌척수액 총단백), 에스바흐 (요단백)
- 굴절계 (TS meter): 요 비중·총고형분·단백질 측정
📌 실전 체크 포인트!
1차 표준물질 순도: 99.95% 이상 / 증류수 순도검정: 전기전도도
포도당 측정 전용 시험관: 폴린-우 (Folin-Wu)
(2) 제단백법
| 구분 |
종류 |
측정 가능 |
| 양이온 침전 |
소모기-넬슨(진당), 폴린-우 |
당·효소·전해질·인산분해효소 |
| 음이온 침전 |
삼염화초산(TCA), 과염소산, 메타인산 |
비단백질소·요소질소·요산·크레아티닌·염소 |
① 특징
- 폴린-우는 침전물이 가장 많고, 삼염화초산은 가장 적으며 여과가 빠르고 효소 활성을 보존
- 자동분석기에는 투석법 (Dialysis)을 이용
📌 실전 체크 포인트!
제단백 없이 측정 불가 성분: 잔여질소
침전물 최다: 폴린-우 (Folin-Wu) / 최소·여과 빠름: 삼염화초산 (TCA)